液相色譜儀HPLC的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器原理：化學(xué)發(fā)光是指在沒(méi)有任何光、電、熱的作用下，只是由于反應(yīng)體系中某種物質(zhì)(反應(yīng)物、產(chǎn)物、中間體或熒光物質(zhì))的分子吸收了反應(yīng)所釋放的能量而由基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài),然后再?gòu)募ぐl(fā)態(tài)返回基態(tài)，同時(shí)將能量以光輻射的形式釋放出來(lái)，產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光的現(xiàn)象。在固相、液相、氣相反應(yīng)中均能觀察到化學(xué)發(fā)光。

由于物質(zhì)激發(fā)態(tài)的能量是來(lái)自化學(xué)反應(yīng)，故叫作化學(xué)發(fā)光。當(dāng)分離組分從色譜柱中洗脫出來(lái)后，立即與適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)發(fā)光試劑混合，引起化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致發(fā)光物質(zhì)產(chǎn)生輻射，其光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度成正比。

液相色譜儀HPLC的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器不需要光源，也不需要復(fù)雜的光學(xué)系統(tǒng)，只要有恒流泵，將化學(xué)發(fā)光試劑以一定的流速泵入混合器中，使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過(guò)光電倍增管將光信號(hào)變成電信號(hào)，就可進(jìn)行檢測(cè)。這種檢測(cè)器的最小檢出量可達(dá)10～12g。

化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的兩個(gè)關(guān)鍵步驟: 激發(fā)和發(fā)射。

第一是反應(yīng)必須能夠提供足夠的激發(fā)能。通常只有那些反應(yīng)速度相當(dāng)快的放能反應(yīng)，其焙變介于170-300kJ/mol之間，才能在可見(jiàn)光范圍內(nèi)觀察到化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象。

第二是化學(xué)反應(yīng)的能量至少能被一種物質(zhì)所接受并產(chǎn)生激發(fā)態(tài)。

第三是處于激發(fā)態(tài)的分子或原子能夠釋放出光子或者將其能量轉(zhuǎn)移給另一個(gè)分子，使此分子激發(fā)，然后以輻射光子的形式回至基態(tài)。

化學(xué)反應(yīng)要產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光需滿足的條件:

第一，該反應(yīng)必須能夠提供足夠的能量且可以被某種反應(yīng)產(chǎn)物或是中間體吸收，使之處于激發(fā)態(tài)，在許多氧化還原反應(yīng)中所提供的能量都能滿足此條件，因此大多數(shù)氧化還原反應(yīng)都是化學(xué)發(fā)光反應(yīng);

第二，化學(xué)反應(yīng)的能量至少能被一種物質(zhì)所接受并使之生成激發(fā)態(tài)。對(duì)于有機(jī)分子的液相化學(xué)發(fā)光而言，從能量上看，容易生成激發(fā)態(tài)產(chǎn)物的往往是一些芳香族化合物和撥基化合物;

第三，處于激發(fā)態(tài)的分子或原子必須具有一定的化學(xué)發(fā)光量子效率使其能釋放出光子，或者能夠轉(zhuǎn)移它的能量給另一個(gè)分子使之進(jìn)入激發(fā)態(tài)并釋放出光子。由此可見(jiàn)，能夠用于HPLC柱后檢測(cè)的化學(xué)發(fā)光是由一些高能量、不放熱、不做電功或其它功的化學(xué)反應(yīng)所釋放的能量，去激發(fā)體系中某些化學(xué)物質(zhì)分子而產(chǎn)生的次級(jí)光發(fā)射, 利用產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光來(lái)對(duì)經(jīng)色譜分離的被分析化合物進(jìn)行測(cè)定

液相色譜儀HPLC化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器的優(yōu)點(diǎn)

化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器（ CD）是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種快速、靈敏的新型檢測(cè)器，具有設(shè)備簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉、線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)。
1靈敏度高

2選擇性好，僅對(duì)被測(cè)組分有響應(yīng)

3樣品可直接分析，不需要前處理

4新型檢測(cè)器

5結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單

6線性范圍寬

3. 缺點(diǎn)
使用的反應(yīng)氣或化學(xué)發(fā)光反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)常是危險(xiǎn)性的氣體

在眾多的液相色譜儀HPLC檢測(cè)器中，化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器(CLD)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，靈敏度高。在大多數(shù)情況下，它的靈敏度比紫外一可見(jiàn)光檢測(cè)器高2-3個(gè)數(shù)量級(jí)，由于它沒(méi)有光源，不存在散射光引起的背景，用于熒光物質(zhì)檢測(cè)時(shí)，靈敏度比熒光檢測(cè)器更高，對(duì)某些物質(zhì)的檢測(cè)甚至可與激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器媲美，靈敏度可達(dá)10-21mol的單分子水平。將高靈敏度的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器與高分辨的高效液相色譜(HPLC)分離手段以適當(dāng)?shù)姆绞较嗟満?，集分離與分析之精華于一體，發(fā)展成為一種理想的分析方法。